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Kromasil液相色譜柱155|大青葉配方顆粒特征圖譜的測(cè)定 高效液相色譜法

更新時(shí)間:2025-02-19  |  點(diǎn)擊率:1283

案例說(shuō)明

大青葉配方顆粒試樣經(jīng)水超聲提取后,采用梯度洗脫,用紫外檢測(cè)器檢測(cè)。大青葉配方顆粒應(yīng)呈現(xiàn)11個(gè)特征峰。

 

分析條件

色譜柱:Kromasil 100-5-C18(w),4.6x250mm (訂貨號(hào):M05WLA25

流動(dòng)相:(A)甲醇        B0.1%磷酸溶液

按下表進(jìn)行梯度洗脫:

時(shí)間/min

流動(dòng)相A%

流動(dòng)相B%

0

0

100

20

3

97

40

20

80

80

45

55

100

70

30

 

流速:1.0mL/min

進(jìn)樣量:10μL

柱溫:30

波長(zhǎng):260nm

 

分析圖譜

依據(jù)上述色譜條件,分別將參照物溶液與供試品溶液注入液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定,

參照物溶液的色譜圖如圖1和圖2所示,色譜圖積分結(jié)果見(jiàn)表1。




1參照物溶液色譜圖積分結(jié)果

目標(biāo)物

保留時(shí)間

峰面積

峰高

理論塔板數(shù)

分離度

對(duì)稱/拖尾因子

尿苷

13.683

1325.626

88.005

20010

-

1.04

腺苷

17.983

1978.065

77.867

14068

8.66

1.57

鳥苷

24.833

1589.416

71.842

30912

11.70

1.09

紫丁香苷

51.983

1822.787

109.000

226580

-

0.96

由表1中數(shù)據(jù)可知,紫丁香苷峰的理論塔板數(shù)為226580,滿足《大青葉配方顆?!分幸?guī)定的不低于5000的要求。

供試品溶液的色譜圖如圖3所示,色譜圖積分結(jié)果見(jiàn)表2,特征峰相對(duì)保留時(shí)間結(jié)果見(jiàn)表3

KTYY-LC-155-大青葉配方顆粒特征圖譜的測(cè)定-圖3供試品.png


2 供試品溶液色譜圖積分結(jié)果

目標(biāo)物

保留時(shí)間

峰面積

峰高

理論塔板數(shù)

分離度

對(duì)稱/拖尾因子

1:尿苷

13.758

3140.146

203.821

19981

-

0.98

2:腺苷

18.108

938.206

40.028

14160

8.72

1.48

3:鳥苷

24.933

1452.136

56.695

26634

11.19

1.39

4

31.950

662.504

35.505

64873

12.61

1.22

5

38.242

625.214

33.416

166222

14.35

1.57

6S:紫丁香苷

52.033

720.704

41.351

242837

34.59

1.18

7

56.233

235.898

12.782

209504

9.19

1.03

8

66.383

621.233

30.348

236654

19.58

0.88

9:異葒草苷

69.067

486.083

20.501

305205

5.13

1.78

10:異牡荊苷

78.400

1677.888

91.957

417521

18.95

1.00

11:異金雀花素

80.108

615.450

32.211

407043

3.46

0.97

 

3 特征峰相對(duì)保留時(shí)間結(jié)果表

目標(biāo)物

保留時(shí)間

相對(duì)保留時(shí)間測(cè)定值

相對(duì)保留時(shí)間規(guī)定值

偏差

4

31.950

0.614

0.567

8.30

5

38.242

0.735

0.686

7.14

6S:紫丁香苷

52.033

-

-

-

7

56.233

1.081

1.159

-6.75

8

66.383

1.276

1.308

-2.46

9:異葒草苷

69.067

1.327

1.352

-1.82

10:異牡荊苷

78.400

1.507

1.465

2.85

11:異金雀花素

80.108

1.540

1.511

1.89

 

由表2和表3中數(shù)據(jù)可知,大青葉配方顆粒供試品溶液的特征峰個(gè)數(shù)為11個(gè),與《大青葉配方顆粒》中規(guī)定的特征峰個(gè)數(shù)一致;峰1-3,峰6的保留時(shí)間與參照物溶液的保留時(shí)間相對(duì)應(yīng),峰4、峰5、峰7、峰8、峰9、峰10和峰11與紫丁香苷(S峰)的相對(duì)保留時(shí)間分別為0.614、0.7351.081、1.276、1.3271.507 1.540,均在規(guī)定值的±10%范圍之內(nèi)。


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